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利用斑马鱼评价供试品温和不刺激

【评价原理】

化妆品中刺激性物质作用于机体后可能引发机体产生刺激、过敏等一系列的生理、生化反应，其中最主要的是刺激反应，可导致水肿、红斑、瘙痒、疼痛等症状。刺激性成分对皮肤的刺激性作用主要是通过诱发炎症反应的通路来实现的，炎症反应的产生将使机体产生免疫应答，各种免疫细胞在趋化因子的作用下向表皮炎症发生的部位迁移、聚集，其中中性粒细胞的敏感性和特异性最强。斑马鱼与人类具有非常相似的免疫系统，利用转基因荧光标记技术将斑马鱼体内中性粒细胞进行荧光标记，当供试品接触到斑马鱼皮肤时，通过观察中性粒细胞的迁移、聚集数量可以反应其是否温和。

【实验方法】

将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照组和供试品组。正常对照组不做处理，供试品组添加受试化妆品。孵育一段时间后，将斑马鱼整体放到荧光显微镜下拍照，以皮肤表面中性粒细胞数量评价供试品是否温和。

【评价指标】

皮肤表面中性粒细胞数量

【结果展示】（展示图片仅供参考，实际实验组别依据合同而定）

图1. 斑马鱼皮肤中性粒细胞数量

黄色虚线区域为计算区域，绿色荧光点为中性粒细胞

【评价结论】

1、供试品组斑马鱼皮肤中性粒细胞数量与正常对照组相比无明显变化。

2、本实验证实了该供试品较温和。

【参考文献】

[1]王涛.丹参酮I的抗炎作用及安全性评价[D]. 广东药科大学, 2018.

[2] Miskolci V, Squirrell J, Rindy J, et al. Distinctin flammatory and wound healing response stocomplex caudal fin injurie soflarval zebrafish[J]. Elife. 2019, 8.

[3] Lavens S E, Proud D, Warner J A. A sensitive colorimetric assay for the release of tryptase from human lung mast cells in vitro[J]. journal of immunological methods, 1993, 166(1): 93- 102.