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利用斑马鱼评价供试品抗光老化作用

【实验原理】

紫外线辐射是导致皮肤损伤和老化最主要的外源性环境因素，容易诱导诸如炎症反应、氧化应激（当自由基产生量大于机体清除能力时就发生氧化应激反应，可能会对细胞结构造成严重损害，）、DNA损伤等生理作用，甚至破坏胶原蛋白、弹性蛋白的活性结构，外观上表现为肌肤的红肿、色素沉着、松弛和细纹等。斑马鱼鱼鳍类似于人类的四肢，皮肤结构与人类相似，紫外线对斑马鱼的损伤将导致一系列的有害生理作用，外观上表现为尾鳍的萎缩、面积减少。护肤产品在皮肤表面对紫外线的有效吸收，将防止紫外线对皮肤造成损伤。

【实验方法】

将斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组、化妆品组。正常对照组不做处理，模型对照组和化妆品组分别进行紫外光多次照射，孵育一段时间后，三组斑马鱼分别进行尾鳍拍照处理，分析斑马鱼尾鳍面积；对斑马鱼整体进行特异性荧光染色，观察斑马鱼卵黄囊活性氧自由基清除情况；将斑马鱼整体放到荧光显微镜下拍照，统计皮肤表面中性粒细胞数量。通过斑马鱼尾鳍面积、卵黄囊活性氧自由基清除情况、皮肤表面中性粒细胞数量来评价抗光老化功效。

【评价指标】

1、晒伤部位恢复（尾鳍面积）； 2、ROS清除率；3、皮肤表面中性粒细胞数量

【结果展示】

（*展示图片仅供参考，实际实验组别依据合同而定）

图1. 斑马鱼尾鳍损伤面积表型图（红色为分析区域）

图2. 斑马鱼卵黄囊荧光表型图（黄色为分析区域，绿色荧光代表氧自由基）

图3. 皮肤中性粒细胞数量

【评价结论】

1、经过各组斑马鱼对比实验，与模型对照组相比，化妆品组尾鳍面积增加、卵黄囊ROS荧光强度减弱、皮肤表面中性粒细胞减少。

2、本实验证实了该化妆品具有抗光老化的作用。

【参考文献】

[1] Chen YH, Wen CC, Lin CY, et al. UV-induced fin damage in zebrafish as a system for evaluating the chemopreventive potential of broccoli and cauliflower extracts[J]. Toxicol Mech Methods. 2011,21(1):63-69.

[2] Cheng CC, Chou CY, Chang YC, et al. Protective Role of Comfrey Leave Extracts on UV-induced Zebrafish Fin Damage[J]. J Toxicol Pathol. 2014,27(2):115-121.

[3] Tsai I T , Yang Z S , Lin Z Y , et al. Flavone is efficient to protect zebrafish fins from UV-induced damage[J]. Drug and Chemical Toxicology, 2012, 35(3):341-346.